- 产品描述
食品基因组DNA提取试剂盒
食品基因组DNA提取试剂盒mericon Sample Preparation Kits适用于从多种初始材料中提纯高品质核酸,如经富集的培养基(mericon DNA Bacteria和 Bacteria Plus Kits)及多种食物原材料与成品(DNeasy mericon Food Kit)等。这些复杂食物样本的纯化产物中所含PCR抑制剂的水平达到最低。纯化获得的DNA适用于各种下游应用,如应用mericon PCR Assays Kits进行real-time PCR成分鉴定、病原体检测;或GMO DNA定量检测。
特点 | 参数 |
应用 | PCR, real-time, genotyping |
洗脱体积 | 100 µl (mericon DNA Bacteria and DNA Bacteria Plus Kit), 150 µl (DNeasy mericon Food Kit) |
规格 | spin columns (DNeasy mericon food Kit), microcentrifuge tube (DNA Bacteria Kit), icrocentrifuge tube with glass beads (DNA Bacteria Plus Kit) |
主要样本类型 | fod, e.g. chocolate, ketchup, cereals (DNeasy mericon Food Kit), bacterial culture from food (DNA Bacteria Kit and DNA Bacteria Plus Kt) |
处理 | manual |
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | DNA |
样本量 | 1 ml culture (DNA Bacteria and Bacteria Plus Kit), 2 g (DNeasy mericon Food Kit) |
技术 | silica technology (DNeasy mericon food Kit), boiling lysis (DNA Bacteria Kit), disruption with glass beads (DNA Bacteria Plus Kit) |
每次运行或制备时间 | 20 minutes - 1 hour (DNeasy mericon Food Kit) |
产量 | depends on DNA contents of the sample |
性能
DNeasy mericon Food Kit
生产过程中,食物容易受到热、高压和pH值变化的影响,这些会导致DNA降解和片段化。DNeasy mericon Food Kit中的优化试剂专为回收短的DNA片段(100 bp)而设计,确保高度片段化的DNA可被有效分离,并在PCR反应中进行扩增。凭借这些优势,DNeasy mericon Food Kit是*个可广泛应用于从强抑制性、多脂、酸性、有很高或很低DNA含量的加工食物中纯化核酸的试剂盒,结果可靠,而且可得到纯化效果(参见High yields of DNA with minimal inhibitor carryover)。
mericon DNA Bacteria和DNA Bacteria Plus Kits
热裂解操作需使用mericon DNA Bacteria Kit,机械裂解需使用mericon DNA Bacteria Plus Kit,两种试剂盒从革兰氏阴性细菌中提取DNA的效率相同。但是,如果从革兰氏阳性细菌中提取DNA,机械裂解更加有效(参见Efficient bacterial DNA extraction)。
原理
DNeasy mericon Food Kit
该试剂盒采用改良的CTAB纯化细胞内核酸。CTAB是非离子去污剂,广泛用于从多种类型的组织样本中高效提纯细胞内核酸。与盐浓度相关,CTAB可能与细胞内核酸结合(低盐浓度);也可与细胞内的抑制剂结合,如多糖、蛋白质和植物代谢产物(高盐浓度,如在Food Lysis Buffer中)。
这种提纯方法的步骤少于传统CTAB 操作方法,应用DNeasy mericon Food Kit可在2.5个小时内可处理多达30个样本(参见Efficient and rapid DNA extraction)。
经优化的方案,采用CTAB和蛋白酶K初步消化紧密组织,然后同时沉淀蛋白质和其他细胞内和来自于食品本身的抑制剂。
离心后抑制剂沉淀下来,而提纯的DNA保留在溶液中。然后进行lv仿抽提,所有剩余的、未沉淀CTAB结合蛋白、CTAB结合杂质或 CTAB 结合多糖都将与其他脂溶性抑制剂一起被抽提入lv仿层。水层中含有DNA和极少的抑制剂,将进一步处理。在水相中加入结合缓冲液(调节结合条件),将其上样到QIAquick Spin Column。纯化后得到的DNA可即用于下游的mericon real-time PCR分析。
mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit
到目前为止,检测食品病原体的主要方法是通过培养基和/或ELISA分析法。分子检测方法,尤其是real-time PCR,经常作为这些常用方法的补充。
热裂解使用mericon DNA Bacteria Kit,适用于多数易于裂解的革兰氏阴性细菌(如沙门氏菌Salmonella spp.、弯曲杆菌Campylobacter spp. 和阪崎氏肠杆菌Cronobacter spp.)。机械裂解需使用mericon DNA Bacteria Plus Kit,适用于革兰氏阳性细菌,如单增李斯特菌Listeria spp.。
mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit中的化学试剂可较高程度上提高裂解效率,稳定提纯的DNA,并去除可能干扰下游应用的抑制剂。
操作流程
DNeasy mericon Food Kit
使用简单的操作方法,从匀质的食物样本中提纯DNA,获得的纯DNA适用于各种下游应用,如real-time PCR成份分析或GMO检测。
mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit
使用机械裂解(钢珠)和热裂解(煮)的操作方法,从病原体富集的培养基中提纯细菌DNA。两种操作方法都需转移细菌 DNA悬浮液,以适用于real-time PCR病原体检测。
应用
应用DNeasy mericon Food Kit从食物原材料或成品中纯化的DNA适用于各种下游应用,如成份鉴定。
mericon Bacteria和Bacteria Plus Kits用于从经过增菌富集培养基中纯化细菌DNA。
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