- 产品描述
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检测由镰刀菌产生的霉菌(T2毒素)检测试剂盒
广州健仑生物科技有限公司
检测由镰刀菌产生的霉菌(T2毒素)检测试剂盒
原理:
本试剂盒采用一步竞争ELISA方法检测玉米、大米、豆类、花生、燕麦、饲料等样本中的T2毒素,试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时,酶标板微孔条上预包被T2毒素抗原与样本中T2毒素竞争抗T2毒素抗体(抗体工作液),同时抗T2毒素抗体与酶标二抗(酶标记物)相结合,经TMB底物显色,样本吸光值与其含有的T2毒素成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中T2毒素的含量。
检测下限:
花生、玉米、燕麦、大豆、饲料等/6ppb
花生、玉米、燕麦、大豆、饲料等样品处理方法
1)取1g粉碎样品,加入20ml样品提取液;
2)剧烈振荡5min;
3)室温4000转/分离心5分钟(或用定量分析滤纸过滤);
4)取上清液,用蒸馏水或去离子水按1∶5(即:取1份上清液+5份去离子水)比例稀释;
5)取50μl进行分析。
稀释倍数:120 检测下限:6ppb
酶联免疫试验步骤
将所需试剂从4℃冷藏环境中取出,置于室温平衡30min以上, 洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解,每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架,将不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
6.1 编 号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
6.2 加样反应:加标准品或样本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶标记物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗体工作液,用盖板膜封板,轻轻振荡5秒混匀,25℃反应30分钟。
6.3 洗 涤:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用工作洗涤液250µl/孔充分洗涤5次,每次间隔30秒,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破)。
6.4 显 色:每孔加入底物液A 50µl,再加底物液B 50µl,轻轻振荡5秒混匀,25℃避光显色15分钟(若蓝色过浅,可适当延长反应时间)。
6.5 终 止:每孔加入终止液50µl,轻轻振荡混匀,终止反应。