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快速检测试剂(胶体金法)使用说明
广州健仑生物科技有限公司
试剂盒供应方向
1.专业疾控系列试剂
2.国际旅行卫生保健中心试剂 /出入境检验检疫局专业试剂
3.血液中心专业科研试剂/输血研究所试剂
广州健仑生物科技有限公司长期供应尼古丁检测试剂盒,违禁品检测试剂盒,药物滥用检测试剂盒,还有各种登革热、疟疾、克锥虫、丝虫、恙虫、黄热病、寨卡、基孔肯雅热等试剂盒、各种抗体质控品。
产品规格:10T/盒
保存温度:4-30度
有效期:2年
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我司还提供其它进口或国产试剂盒:登革热、疟疾、流感、A链球菌、合胞病毒、腮病毒、乙脑、寨卡、黄热病、基孔肯雅热、克锥虫病、违禁品滥用、肺炎球菌、军团菌、化妆品检测、食品安全检测等试剂盒以及日本生研细菌分型诊断血清、德国SiFin诊断血清、丹麦SSI诊断血清等产品。
【营销中心】 广州清华科技园番禺区石楼镇创启路63号二期2幢101-103室
【公司企业文化】
Real-time CR现已成为一种成熟的mRNA定量手段,Taqman探针和Sybr-Green法是常用的两种方法。其中,Sybr-Green法因为使用方便、价格相对低廉而被广泛使用,但是这种方法对引物的要求更高,因此,引物的设计是成功进行Sybr-Green法Real-time CR检测的关键。很多科研人员,尤其是做临床的,做CR实验只是一时的需要,并没有花时间去深入研究引物设计本身。
选择qCR引物时,该注意的问题有哪些呢?
1、引物特异性
很多人以为引物特异性就是指的扩增产物单一,其实转录组相似序列的干扰也常常是造成检测假阳性的主要原因,尤其是在目标转录本表达水平较低而相似序列表达量高的情形下。对于扩增产物单一性的检测,我们需要查看熔解曲线是否单一,还要看CR产物电泳图是否单一。如果需要保证高度单一,还可以采用Labchi进行产物分析(可以区分4b大小的片段)。
2、可变剪切
除此之外,还要特别注意可变剪切。RNA的可变剪切可以导致产生不同的转录本,并导致翻译编码形成多种蛋白,可变剪切是调节基因表达和产生蛋白质多样性的重要机制。据估计人类基因组出现可变剪切的几率高达60%。当需要检测某个特定剪接体的转录水平时,引物设计需使得扩增子限定在区别于其他剪接体的区段。否则检测到的转录水平是所有剪接体的总和而不是特定剪接体。
3、扩增效率
如果要用ΔΔCT方法进行最后的计算,就需要目的基因和内参基因有相近的扩增效率。较好的引物扩增效率应该在90%-110%,且线性回归系数R2大于0.98。
4、引物生产工艺
引物在生产的过程中一般都会有大约0.01%的错误可能(根据不同生产商,会略有差异)。除此之外,还有副产物(脱盐纯化)以及大量盐分(尤其是age纯化),虽然这不一定影响CR实验,但是可能会导致实验不稳定。