- 产品描述
泰国S&A沙门氏菌诊断血清套装
沙门氏菌鉴定分型诊断血清套装(60瓶)
试验方法
O抗原检测步骤
将沙门氏菌接种到非选择性琼脂培养基上,35-37℃培养18-24小时。
- 滴一滴生理盐水(0.85%氯化钠)于洁净载玻片上作为对照。从非选择性琼脂培养基平板上取一满环培养物与载玻片上生理盐水混合。30S内凝集表明是粗糙型菌株。该菌株不能用于血清学分型。如果不凝集继续进行血清学分型并记录。
- 滴一滴沙门氏菌抗血清于洁净载玻片的测试区域。从非选择性琼脂培养基平板上取一满环培养物于抗血清上。将培养物与抗血清充分混合,轻轻晃动载玻片1分钟。如果凝集表明菌株含有这种抗血清中特定的一种O抗原。
说明:
首先用O多价血清进行凝集,如果菌株与O多价血清发生凝集,则继续使用O多价血清中包含的相应的群血清进行测定。如果菌株与某一O群血清发生凝集,则继续使用该群包含的单因子抗血清进行测试。
Vi抗原检测步骤
一些伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌和都柏林沙门氏菌可能出现与O抗血清不凝集,必须使用Vi抗血清进行测定。从营养琼脂(NA)、胰胨大豆琼脂(TSA)或三糖铁琼脂(TSI)上挑取新鲜培养物进行Vi抗血清测定。如果试验结果显示此培养物能与Vi抗血清发生凝集反应而不能与O抗血清发生凝集反应,则取两环培养物悬浮于1mL普通生理盐水中(NSS0.85%),100℃沸水浴15-60分钟以破坏Vi抗原。取沉淀物用O抗血清重新进行玻片凝集试验,应该是显示阳性结果。
H抗原检测步骤(Sven Gard技术)
挑取非选择性琼脂培养基上的培养物一环点种于Swarm Agar平板中间,35-37℃培养18-24小时。有动力的菌株在Swarm Agar平板表面蔓延生长。
- 分别滴一滴生理盐水和一滴H抗血清于载玻片的两个测试区域。
- 用接种环从Swarm Agar点种区边缘挑取培养物,分别与生理盐水和H抗血清充分混合。
- 轻微摇动载玻片30s至1min,观察反应结果,菌株不应与生理盐水凝集。
- 应先依次使用H多价抗血清进行测定。
对试验结果的解释
于1分钟内呈明显凝集者为阳性,呈均匀乳白色混浊者为阴性。
注意事项
- 被检菌应首先用O多价血清及O因子血清鉴定其O抗原,在必要时以Vi血清鉴定其Vi抗原,然后以H血清鉴定其鞭毛抗原,参考沙门氏菌属诊断抗原表,并根据生化反应特性,做出菌型诊断。
- 生化反应符合沙门氏菌定义,但与O多价血清不凝集或用本组血清不能定型的菌株,可送往有条件定型的机构,做出菌型鉴定。
- 血清已用生理氯化钠溶液稀释,使用时不必再做稀释。
- 防止冻结,在有效期内使用。
包装和规格
纸盒包装,每盒60种,共计60瓶(多价血清2Ml/瓶,单因子血清1Ml/瓶)。
沙门氏菌鉴定分型诊断血清套装(60瓶)
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要进行O凝集反应,必须先洗掉Vi抗原。 纤毛抗原是一种比鞭毛更细小的纤维样结构物,含有蛋白性的抗原物质。纤毛能凝集豚鼠的红细胞。所有沙门氏菌的纤毛抗原性一样。纤毛的存在不影响活菌的凝集性,但含有极丰富的纤毛抗原的菌株,有时也组织O的凝集性。