汉坦病毒肺综合征检测试剂

汉坦病毒检测试剂盒

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预期用途
此酶免试剂盒可用于流行性出血热（EHF）病人血清中抗汉坦病毒IgG和IgM的定性检测。
人流行性出血热（EHF）检测试剂盒。人流行性出血热（EHF）检测试剂盒。人流行性出血热（EHF）检测试剂盒。

前言简介
流行性出血热（EHF）又称肾病综合征出血热（HFRS），是由汉坦病毒（Hantaan type）引起的。与流行性肾病相比（因近距离接触普马拉病毒而被传染），HFRS的传染性更严重，一般都会伴随有尿毒症、呼吸麻痹和伴随有典型休克综合症的出血，甚至死亡。这种疾病起初的症状是流行性感冒样症状。HFRS起初的典型症状是血小板减少症和白细胞增多症。汉坦病毒主要分布于亚洲和巴尔干各邦地区，通过直接接触啮齿动物、啮齿动物的排泄物或分泌物而传染给人。士兵、农民和露营者都特别容易受到危险。
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实验原理
包被孔中包被了重组的汉滩型汉坦病毒核壳体蛋白。在检测IgM抗体时，为了避免由IgG抗体或类风湿因子引起的非特异性因素的干扰，病人血清必须与类风湿因子IgG吸附剂一起孵育。
实验过程孵育期间，抗重组汉坦病毒抗原的特异性抗体会结合到固相包被板上。洗板后，我们分别用过氧化酶标记的抗人IgG和IgM抗体检测特异性的IgG和IgM。加入底物液后显色，溶液所显示的颜色强度与结合的抗体量成正比。之后用酶标仪读取OD值。
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贮存及稳定性
试剂盒应当在2~8℃运输和储存，避免高温和阳光直射，没有打开的试剂能保存到有效期。包被条在封闭的袋子内2~8℃能保存到有效期。准备好的试剂的储存及其稳定性在相应章节已阐明。
开封的微孔板密封放置2-8℃下可保存至有效期
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样品采集和贮存

人血清

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试剂盒成分

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实验做需器材但试剂盒没提供

·         精确微移液管  体积（5; 20; 50; 100; 200; 1000 µL）

·         涡旋混合器

·         保温箱, 37°C

·         试管（用于样品稀释）

·         8道微量移液器

·         洗瓶,自动或半自动洗板机

·         酶标仪

·         双蒸水或去离子水

·         吸水纸,吸嘴,计时器

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实验前准备
实验前将试剂盒平衡至室温（18-25°C）.含结晶的缓冲浓缩液可在37°C下迅速将其溶解.实验前将其冷却至至室温（18-25°C）
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稀释浓宿成分的准备（以测32孔为例）
提示:实验前取所需量试剂,并迅速用于稀释.

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样品稀释

提示:未稀释样品可于-20°C下保持数月
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实验步骤
1将100μl即用型阳性质控、阴性质控、参考对照质控和稀释血清样品（如是IgM样品,需用类风湿因子吸附剂前处理）加入到相应的微孔中。
2胶粘薄膜盖板，37℃下温育45分钟。
3移除胶粘薄膜, 弃除孔内反应液.每孔加入300μl稀释洗涤液，重复洗板4次，在吸水纸上拍干去除残留液滴。
4每孔中加入100μl稀释酶联物（IgG 或IgM）
5胶粘薄膜盖板。37℃下温育45分钟.
6移除胶粘薄膜, 弃除孔内反应液.每孔加入300μl稀释洗涤液，重复洗板4次，在吸水纸上拍干去除残留液滴。
7加底物液和终止液,建议用8道微移液器,保证加液相等的时间间隔。避免产生气泡。
8每孔中加入100μl TMB底物液
9室温（18-25°C）温育10分钟
10每孔中加入100μl终止液终止底物液反应。
1120分钟内于酶标仪450nm处读取OD值。（参考波长：650nm）
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8、结果计算
用病人样品的OD值比上参考对照质控的OD值计算检验结果
A病人样品/ A参考对照质控= Q

·         IgG抗体：

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·         IgM抗体：

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本译文由广州健仑生物科技有限公司技术人员编译，仅供参考，请以英文原版说明书为准或与我们公司工作人员！

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汉坦病毒现状 

       肾综合征出血热（以下简称出血热）是由汉坦病毒引起的一种自然疫源性疾病，是《中华人民共和国传染病防治法》规定的乙类传染病。
       我国每年肾综合征出血热发病人数占世界报道的汉坦病毒感染病例的90%以上，是受汉坦病毒危害zui为严重的国家。我国大陆的31个省、市、自治区均有病例发生。我国年发病数zui高曾超过11万，近十年来我国年报告发病人数一直在2～5万左右，新疫区不断出现，并时有暴发流行，老疫区的类型也有所变化

   因此，开展肾综合征出血热的流行病学监测具有十分重要的意义，美国Focus公司进口原装的肾综合征出血热ELISA试剂盒，已通过美国FDA认证、欧洲CE认证，可对出血热调查及血清学检测提供可靠的依据。