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犬粪包虫抗原检测试剂盒-使用说明书
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【原理】
本试剂采用ELISA方法用于犬粪便中包虫抗原的检测。
【试剂组成】
1.预包被板 | 48T/96T; |
| 7. 样本稀释液(5号液) | 1支; |
2.酶结合物(1号液) | 1支; |
| 8. 终止液(6号液) | 1支; |
3.浓缩洗涤液(2号液) | 1支; |
| 9. 阳性对照品 | 1支; |
4.底物(3号液) | 1支; |
| 10.阴性对照品 | 1支; |
5.显色剂(4号液) | 1支; |
| 11.不干胶膜 | 1/2片; |
6.2X浓缩粪便处理液 (7号液,用前以蒸馏水等体积稀释) | 1支; |
| 12.自封袋 | 1个; |
13.使用说明书 | 1份 |
【操作程序】
1. 样品处理 犬粪样品需要预先低温(-70℃以下)冷冻7天以上,以灭活虫卵。称取1克犬粪,加入1ml已稀释的粪便处理液,充分搅拌混匀,静置10分钟,再经5000rpm离心30分钟,取上清液检验。
2. 洗涤液配制 用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液(2号液)按1:10稀释,如取50ml浓缩液与450ml蒸馏水或去离子水充分混匀即为工作洗涤液。
3. 加样反应 每次试验设阴性对照2孔、阳性及空白对照各1孔;其中阴、阳对照孔分别加入阴性、阳性对照各100ul,空白对照孔加入样品稀释液(5号液)2滴。其它各样本检测孔先滴加样品稀释液(5号液)各1滴,再取犬粪上清液50ul加入板孔中。37℃下避光反应30分钟,甩去孔内液体。用已稀释的洗涤液洗涤4次,每次静止1分钟,拍干。
4. 加酶反应 除空白孔外,各孔加酶结合物2滴。37℃下避光反应30分钟,甩去孔内液体。用已稀释的洗涤液 洗涤3次,每次静止1分钟,拍干。
5. 显色反应 加底物液(3号液)和显色剂(4号液)各1滴,混匀,37℃避光显色10分钟。加终止液(6号液)1滴,终止反应(加终止液后,蓝色会变为黄色)并判读结果。
【结果判断】
阴性对照呈无色或浅黄色,阳性对照呈明显黄色,表示试验有效。
以空白对照调零,用酶标仪于450nm(630nm作参比波长)读取吸光度(A值)。待检孔A值大于阴性对照A值平均值的3.1倍者判为阳性。如阴性对照A值的平均值低于0.10时按0.10计算。
【注意事项】
1.试剂盒于2-8℃保存,有效期12个月。每次使用前应先平衡至室温。
2.未使用完的板条应密封保存。
3.试剂盒中终止液具有腐蚀性,要小心使用。
4.瓶盖每次使用后要拧紧,各瓶盖之间不可混用。不同批号试剂盒的试剂组分不可混用。
5.应采集新鲜的犬粪样本进行测试。若不能及时检测,应将粪样放置低温冻存,防止腐败或反复冻融。如犬粪难以溶解,应适当捣碎处理。任何样本都应作为传染源来处理。
6.37℃孵育时,建议使用水浴箱。如无条件,可使用湿盒放入温箱并同时用不干胶膜封盖板孔。
7.浓缩洗涤液及浓缩粪便处理液若出现结晶时,应置37℃至溶解。
【公司名称】 广州健仑生物科技有限公司
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什么是包虫病?
包虫病(hydatidosis, hydatid disease),又称棘球蚴病,是细粒棘球绦虫的幼虫感染人体所致的疾病。该病为人畜共患病。狗为终宿主,羊、牛是中间宿主;人因误食虫卵成为中间宿主而患包虫病。