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包虫抗体检测试剂盒使用说明书
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临床意义
包虫病(Hydatid diseas,Hyd)由棘球绦虫的中绦期(即包虫)寄生机体所致,检测特异性包虫抗体可作为包虫感染的辅助诊断指标。
本试剂盒采用包虫囊液抗原作固相抗原检测犬血清中的特异性包虫抗体。本试剂灵敏度高,特异性强(对正常群体接近100%),重复性好,操作方便快速,可分多次使用。
试剂组成
1. 预包被板48T/96T; 6. 样本稀释液(5号液) 1支;
2. 酶结合物(1号液) 1支; 7. 终止液(6号液) 1支;
3. 洗涤液(2号液) 1支; 8. 阳性对照品 1支;
4. 底物(3号液) 1支; 9. 阴性对照品 1支;
5. 显色剂(4号液) 1支; 10. 使用说明书 1份;
操作程序
· 加样反应:取出所需量的反应板条,每孔加样本稀释液(5号液)2滴,再分别加入待检的血清样本10ul,混匀。同时设阴性、阳性及空白对照各1孔,阴性、阳性对照与待检样本同步处理,空白对照孔仅加入样本稀释液(5号液)2滴。37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体,每孔加洗涤液(2号液)1滴,立即用蒸馏水注满,静置30秒后甩去,再直接用蒸馏水洗涤四次,甩去,拍干。
· 加酶反应:除空白对照孔外其余每孔加酶结合物(1号液)2滴,37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体,如上洗涤,拍干。
· 显色反应:加底物(3号液)和显色剂(4号液)各1滴,混匀,37℃下避光显色10分钟。加终止液(6号液)1滴,混匀,终止反应(加终止液后蓝色会变为黄色)并观察结果。
结果判断
· 肉眼观察:阴性对照接近无色,阳性对照呈明显黄色,表示试验有效。待检孔接近无色表示该标本为阴性,待检孔呈明显黄色表示该标本为阳性。
· 仪器判断:以空白对照调零用酶标仪于450nm(620nm作参比波长)读取O.D值,待检孔O.D值大于阴性对照2.1倍者为阳性。当阴性对照O.D值低于0.05时按0.05计算。
注意事项
· 试剂盒在2-8℃下保存,每次取出时先平衡至室温后使用。滴瓶每次用后一定要将盖拧紧,各瓶盖之间切不可混用。各试剂盒之间不可混用。
· 洗涤时将蒸馏水加满孔内,每次停放三十秒钟,甩去孔内液体。禁用自来水等其它水源。
· 为提高试验的可比性,建议使用仪器判读结果。
· 如有条件,使用水浴箱孵育。
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