西尼罗河检测试剂可用于定性检测人血清中的西尼罗病毒IgM抗体,用于临床实验室诊断临床上有与脑膜脑炎症状相的病人西尼罗病毒的感染。阳性的结果必需用蚀斑减少中和试验(PRNT)来证实,或者使用现有的CDC的的指南来确诊该疾病。
西尼罗河热(WestNilefever)是由西尼罗病毒经蚊子传播的急性发热性疾病可侵犯中枢神经系统,引起脑炎。在非洲南欧、中东、中亚和西亚大洋洲等地呈地方性流行。临床表现主要有发热、皮疹和淋巴结肿大侵犯中枢神经系统,可产生脑炎症状。
西尼罗河检测试剂基于双夹心法原理:未知的样本与质控品加入到微孔(包被有抗人IgM)中进行温育,样本中的特异性抗体会结合到微孔板上。洗板之后分别加入西尼罗河病毒抗原(WNRA)和普通细胞抗原(NCA)进行反应。
再次洗板后加入酶联物,用于检测所结合的抗原。三次洗板后加入底物液,一段时间后加入终止液终止颜色反应,溶液变为黄色。450nm下测量OD值。结果中WNRA与NCA的比值ISR可用于结果的判定。
在使用前将所有试剂和样品平衡至室温,并轻轻倒转使其充分混匀。将10X的浓缩洗涤液稀释,将120ml的浓缩洗涤液加上1080ml的蒸馏水,摇匀,至无任何沉淀,稀释好的洗涤液可在室温下放置两个星期。
准备实验所需的板条,剩余的板条应尽快放入袋子里重新密封,在2-8℃下储存至保质期。