多通道荧光定量PCR仪因操作方便、运行速度快、实验结果准确,受到越来越多的分子生物学研究者青睐。在实验技术成熟的今天,也许对你来说,难得不是实验技术上的问题,而是选择哪一种荧光定量PCR仪,面对各种不同性能的产品,您又该如何选择呢?
选择PCR仪前,首先建议大家走出认识荧光定量PCR的两个误区:
误区一:仪器通道越多越好
随着PCR技术的成熟运用,多重扩增越来越热闹,荧光定量PCR仪也不能幸免。从单通道荧光定量PCR仪发展到如今各个厂家都推出4通道、5通道甚至6通道荧光定量PCR仪,眼花缭乱的选择让人无所适从,就有人一不小心走进了“通道越多越好”的误区。
考虑多通道荧光定量PCR仪的通道数的时候也应该从实验室实际情况出发,多重PCR并非人人适用、人人可用,因为它使实验复杂化了。
误区二:PCR仪无需梯度功能
对于使用染料法的定量PCR反应,虽然有各种各样的PCR引物设计软件或者经验公式计算熔解温度(Tm值),但运用的公式不同、引物序列不同,Tm值的差异会很大。梯度PCR的出现部分解决了一些问题——在反应过程中每个孔的温度控制条件可以在指定范围内按照梯度变化,根据结果,一步就可以摸索出适合的反应条件。
使用有梯度功能的荧光定量PCR可以一次完成以往多次实验才能完成的优化过程,简化了摸索PCR反应条件的繁琐实验,既节省实验时间提高效率,又节省实验成本。