基孔肯雅热的特征是突然发热，经常伴有关节痛。其他常见症状还包括肌肉疼痛、头痛、恶心、疲劳和皮疹。关节疼痛通常使患者极为虚弱，但往往持续数天或延长至数周。因此，该病毒可引起急性、亚急性或慢性疾病。在开始试验前，请仔细阅读试验说明。结果的可信度是依赖于严格地按照实验说明来进行的，铺板时zui少留1个孔为空白对照（A1）1个阴性质控孔（B1）2个临界质控孔（C1+D1）1个阳性质控孔（E1）。开始试验前，请将所有试剂都平衡到室温
1.吸取50μL的质控品和稀释过的样本到相应的孔中，留A1孔做空白对照孔；
2.封板；
3.在37±1℃下孵育1小时±5分钟；
4.当孵育完成时，揭去封板片，弃去反应液，每孔300μL洗涤液，洗板3次，避免溢出。每孔浸泡的时间都必须＞5秒，zui后拍板将残留的液滴都拍去。
5.吸取50μL基孔肯雅溶液1到除了空白对照孔的每个孔中，盖板；
6.在室温孵育30分钟；
7.重复步骤4；
8.将基孔肯雅溶液2跟链霉亲和素结合物混匀10分钟；
9.吸取50μL基孔肯雅溶液2跟链霉亲和素的复合物到除了空白对照孔的每个孔中，盖板。
10.室温孵育30分钟；
11.重复步骤4；
12.吸取100μLTMB底物液到每个孔中；
13.避光孵育15分钟（）；
14.加入100μL终止液到每个孔中，与加TMB底物液时的间隔和顺序都必须一样；
15.用酶标仪在加入终止液后30分钟内与450/620nm处检测。

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